बैक्टीरियल एंडोटॉक्सिन परीक्षण के लिए क्रोमोजेनिक तकनीक का अनुप्रयोग

क्रोमोजेनिक तकनीक उन तीन तकनीकों में से एक है जिसमें हॉर्सशू केकड़े (लिमुलस पॉलीपेमस या टैचीप्लस ट्राइडेंटेटस) के नीले रक्त से निकाले गए अमीबोसाइट लाइसेट का उपयोग करके ग्राम-नेगेटिव बैक्टीरिया से एंडोटॉक्सिन का पता लगाने या मात्रा निर्धारित करने के लिए जेल-क्लॉट तकनीक और टर्बिडिमेट्रिक तकनीक भी शामिल है।नियोजित विशेष परख सिद्धांत के आधार पर इसे एंडपॉइंट-क्रोमोजेनिक परख या काइनेटिक-क्रोमोजेनिक परख के रूप में वर्गीकृत किया जा सकता है।

प्रतिक्रिया सिद्धांत यह है कि: अमीबोसाइट लाइसेट में सेरीन प्रोटीज़ एंजाइम (प्रोएंजाइम) का एक झरना होता है जिसे बैक्टीरियल एंडोटॉक्सिन द्वारा सक्रिय किया जा सकता है।एंडोटॉक्सिन सक्रिय एंजाइमों (जिन्हें कोगुलेज़ कहा जाता है) का उत्पादन करने के लिए प्रोएंजाइम को सक्रिय करते हैं, बाद वाला रंगहीन सब्सट्रेट के विभाजन को उत्प्रेरित करता है, जिससे पीले रंग का उत्पाद पीएनए निकलता है।जारी पीएनए को फोटोमेट्रिक रूप से 405nm पर मापा जा सकता है।और अवशोषण को एंडोटॉक्सिन एकाग्रता के साथ सकारात्मक रूप से सहसंबद्ध किया जाता है, फिर एंडोटॉक्सिन एकाग्रता को तदनुसार मात्राबद्ध किया जा सकता है।


पोस्ट करने का समय: सितम्बर-29-2019