एंडोटॉक्सिन परीक्षण ऑपरेशन में प्रयोग के हस्तक्षेप से कैसे बचें?

हस्तक्षेप से बचने के लिए महत्वपूर्ण कारक के रूप में बैक्टीरियल एंडोटॉक्सिन परीक्षण (बीईटी) अधिकांश आधुनिक प्रयोगशालाओं में नियंत्रित परिस्थितियों में किया जाता है।

उपयुक्तसड़न रोकनेवाली तकनीकमानकों को तैयार और पतला करते समय और नमूनों को संभालते समय यह महत्वपूर्ण है।गाउन पहनानासामान्य प्रयोगशाला व्यक्तिगत सुरक्षा उपकरण के बाहर अभ्यास करें (पीपीई) आवश्यकताएं तब तक चिंता का विषय नहीं है जब तक कि परीक्षण के तहत उत्पाद विषाक्तता या संक्रामकता के कारण विशिष्ट विश्लेषक सुरक्षा विचारों की मांग नहीं करता है।दस्तानेटीएएलसी मुक्त होना चाहिए, क्योंकि टीएएलसी में एंडोटॉक्सिन के महत्वपूर्ण स्तर हो सकते हैं।प्लेट रीडर, जल स्नान, और शुष्क ताप ब्लॉकनमूना ऊष्मायन के लिए उपयोग हीटिंग, वेंटिलेशन और एयर कंडीशनिंग (एचवीएसी) नलिकाओं, महत्वपूर्ण कंपन और प्रयोगशाला यातायात से दूर एक प्रयोगशाला बेंच पर होना चाहिए जो परीक्षण परिणामों को प्रभावित कर सकता है।नमूना धारण समय और शर्तेंयह सुनिश्चित करने के लिए कि योग्य समय में सटीक परीक्षण परिणाम उत्पन्न किए जा सकते हैं, निर्धारित किया जाना चाहिए और यदि आवश्यक हो तो बाद में दस्तावेजीकरण किया जाना चाहिए।

उदाहरण के लिए, यदि प्रयोगशाला को इंजेक्शन के लिए पानी (डब्ल्यूएफआई) या प्रक्रियाधीन नमूना प्राप्त होता है, तो क्या इसे प्रशीतित किया जाना चाहिए या क्या इसे कमरे के तापमान पर रखा जा सकता है, और कितने समय तक?परीक्षण से पहले, यह अनुशंसा की जाती है कि प्रत्यक्ष परीक्षण या बाद में कमजोर पड़ने के लिए परीक्षण एलिकोट को हटाने से पहले प्राथमिक नमूना कंटेनर को पर्याप्त रूप से मिश्रित किया जाए।

बायोएंडो बैक्टीरियल एंडोटॉक्सिन टेस्ट, प्रयोग शामिल हैंजेल थक्का विधिएंडोटॉक्सिन परीक्षण परख औरमात्रात्मक एंडोटॉक्सिन परीक्षण परख, जेल क्लॉट विधि एंडोटॉक्सिन परीक्षण परख गुणात्मक एंडोटॉक्सिन का पता लगाने के लिए है, इन प्रयोगों के लिए उपभोग्य सामग्रियों की आवश्यकता होती है, जैसे कि एंडोटॉक्सिन मुक्त प्रतिक्रिया ट्यूब, कमजोर पड़ने वाली ट्यूब और पाइरोजेन मुक्त युक्तियाँ;मात्रात्मक एंडोटॉक्सिन का पता लगाने के लिए काइनेटिक क्रोमोजेनिक एंडोटॉक्सिन परीक्षण, काइनेटिक टर्बिडीमेट्रिक एंडोटॉक्सिन परीक्षण की आवश्यकता होती है, इन प्रयोगों के लिए उपभोग्य सामग्रियों को एंडोटॉक्सिन के शीर्ष स्तर से कम पूरा करना होगा।0.005EU/एमएल(0.001ईयू/एमएल), जैसे एंडोटॉक्सिन मुक्त ट्यूब, पाइरोजेन मुक्त टिप्स, और पाइरोजेन मुक्त माइक्रोप्लेट्स, यहां तक ​​कि पाइरोजेन मुक्त जलाशय।वैसे, यदि नमूनों का उपचार किया जाता है, तो कंटेनर में एंडोटॉक्सिन मुक्त नमूना बोतल होनी चाहिए।

 

एंडोटॉक्सिन परीक्षण में, विभिन्न स्रोतों से हस्तक्षेप उत्पन्न हो सकता है, जैसे नमूना मैट्रिक्स घटक, परीक्षण अभिकर्मक, या उपकरण।

प्रयोग में व्यवधान से बचने के लिए निम्नलिखित उपाय किए जा सकते हैं:

1. नमूना तैयार करना: सटीक एंडोटॉक्सिन परीक्षण के लिए उचित नमूना तैयार करना आवश्यक है।

एंडोटॉक्सिन परख के साथ अनुकूलता सुनिश्चित करने के लिए नमूना मैट्रिक्स का पूरी तरह से परीक्षण और अनुकूलन किया जाना चाहिए।

विशेष रूप से, लिपिड और प्रोटीन जैसे हस्तक्षेप करने वाले पदार्थों को निस्पंदन या सेंट्रीफ्यूजेशन जैसी उचित तकनीकों का उपयोग करके हटा दिया जाना चाहिए या कम किया जाना चाहिए।

2. सकारात्मक और नकारात्मक नियंत्रण: हस्तक्षेप की निगरानी के लिए परख में सकारात्मक और नकारात्मक नियंत्रण शामिल करना आवश्यक है।

सकारात्मक नियंत्रण परीक्षण की कार्यक्षमता की पुष्टि करते हैं, जबकि नकारात्मक नियंत्रण परख घटकों से किसी भी संदूषण या हस्तक्षेप का पता लगाते हैं।

3. गुणवत्ता नियंत्रण: परख में प्रयुक्त सभी अभिकर्मकों, उपकरणों और पानी पर गुणवत्ता नियंत्रण किया जाना चाहिए।

यह सुनिश्चित करता है कि अभिकर्मक एंडोटॉक्सिन संदूषण से मुक्त हैं और सही ढंग से काम कर रहे हैं।

4. मानकीकरण: यह सुनिश्चित करने के लिए परख को मानकीकृत किया जाना चाहिए कि सभी परिणाम तुलनीय और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य हैं।

इसमें परख को जांचने के लिए एक मानक वक्र का उपयोग और नमूना तैयार करने, ऊष्मायन और पता लगाने के लिए मानकीकृत तकनीकों का उपयोग शामिल है।

5. सत्यापन: यह सुनिश्चित करने के लिए परख को मान्य किया जाना चाहिए कि यह विशिष्ट, संवेदनशील और विश्वसनीय है।

इसमें परख की सटीकता और परिशुद्धता निर्धारित करने के लिए कई प्रकार के नमूनों का परीक्षण करना शामिल है, जिनमें एंडोटॉक्सिन युक्त ज्ञात नमूने भी शामिल हैं।

इन उपायों का पालन करके, हस्तक्षेप को कम किया जा सकता है, और सटीक एंडोटॉक्सिन परीक्षण प्राप्त किया जा सकता है।